奥林巴斯数码相机

目的:根据DNA分子的大小进行分离。这可以用于法医目的,以寻找特定基因中的疾病或亲子鉴定。

简要概述:DNA是带负电荷的,为了按大小将其分离,将其置于溶液中,溶液中流过的电流将带负电荷的DNA拉到另一端。

更大的DNA片段在溶液中会遇到更大的阻力,因此在相同的时间后不会像较小的片段移动得那么远。

一旦通电,就会加入一种染料,以观察DNA的条带(也称为条带),并根据它们的位置来确定DNA的长度(以单位来测量)碱基对).

它是如何工作的

这个过程包括限制性内切酶、梳子、缓冲液、霰粒糖凝胶、DNA、尺寸标准和电泳箱

词汇表

缓冲区:允许电荷通过凝胶的极性溶液。

加载缓冲区:一种主要由溴酚蓝在50%甘油溶液中制成的跟踪染料(也可以是二甲苯、氰醇和蔗糖)。甘油使DNA变稠,这意味着它会在凝胶中下沉,而不是在缓冲液中漂浮。

限制性内切酶:切断特定序列的DNA的细菌。

道:在凝胶中形成的DNA带

基本步骤

  1. Aragonese和缓冲液混合在一起,然后微波形成凝胶。它被倒进一个模子里,然后在模子里放一个“梳子”,在里面打洞,让DNA插入。一旦冷却,梳子就被移走。Gel-Electrophoresis-Steps
  2. 然后将凝胶放入凝胶电泳箱,将缓冲溶液倒在凝胶电泳箱上。缓冲器引导电流。
  3. 为了制备DNA,必须使用限制性内切酶。
  4. 用微管将DNA插入孔中(以及尺寸标准)。尺寸标准已经包含了装载缓冲液,但DNA样本需要它。加载缓冲液对DNA进行染色,使其变厚。
  5. 这时就接通了电流。DNA所在的一侧带负电,另一侧带正电。DNA中的磷酸基是负的,把它拉向正的一边。DNA排斥负电荷开始运动。
引用这篇文章:William Anderson (Schoolworkhelper编辑团队),“Gel Electrophoresis: Basics & Steps”,在SchoolWorkHelper, 2019,//www.chadjarvis.com/gel-electrophoresis-basics-steps/

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