显微镜细胞实验室:脸颊，洋葱，斑马鱼

介绍

这个实验室的目的是利用显微镜识别细胞，如动物细胞和植物细胞。这门课很重要，因为在生物学课上，我们会在不同的实验练习中多次使用显微镜。显微镜被用来观察许多用肉眼看不见的标本。

人类只有0.1毫米的分辨率，也就是区分两个或多个近距离物体的能力。普通显微镜的分辨率可达0.2微米。在这个实验室里，我们调整了显微镜的分辨率，以便更好地观察观察到的标本。此外，我们还需要在这个实验室里观察一些样本的对比。

对比的定义是能够在手边看到样品的不同部分。在本实验室中，为了提高某些样品的对比度，我们使用亚甲基蓝和水对样品进行了染色。这个实验室的主要假设是，我们能否使用复合显微镜来观察我们肉眼无法看到的样本?

材料、方法和结果

在这次实验中，我们的主要仪器是复合显微镜。为了制备用于观察的样品，使用了某些材料。我使用的工具如下:

• 复合显微镜
• 牙签
• 幻灯片
• 盖滑倒
• 亚甲蓝
• 水
• 洋葱头
• 钳
• 刀片
• 洋葱头
• Zebrina茎
• 实验室练习手册
• 铅笔

在这个实验室中有三个小实验室程序。第一个实验是观察动物细胞，这次是我的脸颊细胞。

第二个实验是观察植物细胞，在这个实验中是洋葱表皮。

第三个实验是观察叶绿体和生物晶体，在这个例子中，是斑马草的薄切片。

在这个实验中做的第一件事是收集材料。我和同桌的另外两个同学一起工作。

动物细胞(面颊鳞状上皮)的观察

我用牙签小心翼翼地在脸颊内侧刮取细胞。然后我把它铺在幻灯片上，加入亚甲基蓝溶液，然后用盖玻片盖住幻灯片。我把幻灯片放在舞台的中心，并确保它与舞台剪辑固定。

物镜的放大率已经是10倍了，所以我把它改成了40倍。我使用粗调将舞台移近。样本并不完全在中间，所以我必须使用X-Y舞台控制来移动幻灯片，这样我就可以直接看到样本。

我还用光圈调整了显微镜的照明。然后我把放大率调到了40倍。我调整微调以获得更清晰的单元格图像。我能正确地看到颊细胞。我能看到细胞质，细胞核和细胞膜。

植物细胞(洋葱表皮)的观察

在这个观察过程中，我们看到了一个植物细胞。一个洋葱球被取出来了。我用钳子取出一小片洋葱，小心地迅速地把它放在载玻片上。我还加水，以确保洋葱片不会变干。

我再次使用光圈调整照明，以对比单元的间隔。我用粗调把舞台移近一点，把放大倍数调到10倍。我能看到每个细胞之间的细胞核和细胞壁。

叶绿体和生物晶体的观察

为了进行观察，我观察了斑马鱼茎的一小部分。茎是从教室前面的桶里取出来的。

这一小部分是用剃须刀片切下一小部分茎干得到的。它被放在滑梯上，然后是水。第一次观察时，看不出什么清晰的东西。

看来斑马的茎割得太粗了。他不得不再剪一次茎，这次剪得很细，但不能太细。重复同样的过程，加水，放盖玻片，把玻片放到舞台上，调整舞台，使图像更清晰。

第二个样本证明要好得多。放大倍率已经设定在10倍，这使细胞看得更清楚。可以看到细胞壁、细胞质、细胞核、叶绿体和晶体。

讨论

• 计算显微镜上镜片的分辨能力。

为了找出复合显微镜中每个透镜的分辨率，我使用了艾比方程。我把适当的数字代入变量，其中d =分辨率(nm)，给出0.612,l =使用的光波长(550 nm)， NA =数值孔径。每次放大率我都重复这个方程，得到了每个镜头的分辨率。

放大	工作距离	数值孔径	分辨能力
10倍	5.1毫米	．22	1530
40 x	0.15毫米	主板市场	517.8461538
100 x(浸)	0.05毫米	1．25	269.28

• 你看到的每个样品都能达到这个分辨率吗?有哪些干扰因素呢?

每个样本的每个分辨率都是不同的。有些样品会要求你选择较高的放大倍数或较低的放大倍数。一些干扰因素可能是使用了污染的样品，如脏的载玻片，使用了错误的染色剂或染料，使用了错误的样品，破损的载玻片，等等。

其他干扰因素可能是不正确地使用设备或损坏的设备，如损坏的物镜，损坏的照明器，光线可能太高或太暗，等等。

• 当NA增加时，消解能力会发生什么变化?

当数值孔径增大时，分辨率会降低。

• 你能观察到动物细胞(颊上皮)和植物细胞(洋葱表皮)之间有什么区别?想一想它的大小、形状和细胞组件。

洋葱表皮细胞是唯一有细胞壁的细胞。此外，它是唯一具有叶绿体的细胞，在叶绿体上可以进行光合作用。脸颊上皮细胞是唯一具有中心粒的细胞，中心粒是在细胞分裂过程中帮助组织染色体的桶状细胞器。

此外，洋葱细胞的呈现是一个挨一个、一个在一个上、一个在下的位置，就像棋盘一样。颊部细胞在某些区域聚集在一起，几乎相互重叠。洋葱细胞看起来几乎是矩形的，而脸颊细胞看起来是椭圆形的。

• 你估计在斑马鱼的每个细胞中有多少叶绿体?

通过观察Zebrina的幻灯片，我估计大约有50个叶绿体。

• 你认为草酸钙晶体有什么功能?

草酸钙是草酸的钙盐。它会形成一种叫做rapins的晶体，我在观察Zebrina样本时看到的就是这种晶体。有趣的是，在阅读有关草酸钙的文章时，我发现它是人类肾结石的主要成分，存在于尿液中。

通过观察草酸钙晶体，它看起来像尖刺/针。据我所知，刺钉是一种武器。所以我的假设是这些晶体被用作某种防御手段。